鱟試劑國家參考品使用說明書
本品系以細菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品為基準(zhǔn)，經(jīng)過協(xié)作標(biāo)定，確定其標(biāo)示靈敏度。
【用 途】鱟試劑國家參考品主要用于標(biāo)定、復(fù)核、仲裁凝膠法鱟試劑靈敏度；標(biāo)定細菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品；驗證細菌內(nèi)毒素檢查法試驗操作及環(huán)境。注
【用 法】
1、將細菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品或工作標(biāo)準(zhǔn)品用細菌內(nèi)毒素檢查用水（簡稱 BET 水）制備成一系列濃度的細菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，需包括 0.125、0.06、0.03、0.015EU/ml 及 2.0λ、λ、0.5λ和 0.25λ（λ為待標(biāo)定、復(fù)核或仲裁的鱟試劑的靈敏度），每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混合 30 秒。
2、將 1 瓶鱟試劑國家參考品加入 2.2ml BET 水復(fù)溶，旋轉(zhuǎn)瓶身使吸附在瓶壁及瓶塞上的鱟試劑粉末也溶于水中。靜置 2 分鐘左右使鱟試劑國家參考品溶解完全后，每 0.1ml 分配于除去外源性內(nèi)毒素的10×75mm 試管中，共分裝 18 管，其中 4 列 4 管、1 列 2 管。同時將需進行標(biāo)定、復(fù)核或仲裁的鱟試劑進行復(fù)溶。3、按《中國藥典》“細菌內(nèi)毒素檢查法”中“鱟試劑靈敏度復(fù)核”項下操作，將鱟試劑國家參考品加入 0.125、0.06、0.03、0.015EU/ml的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素溶液；同時將待標(biāo)定、復(fù)核或仲裁的鱟試劑加入 2λ、λ、0.5λ、0.25λ的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素溶液，并各制備 2 支陰性對照。封口膜封口，同時保溫 60 分鐘±2 分鐘后，觀察并記錄結(jié)果。
4、當(dāng)鱟試劑國家參考品的最大濃度 0.125EU/ml 4 管均為陽性，最低濃度 0.015EU/ml 4 管均為陰性，陰性對照為陰性時實驗為有效，按下式計算反應(yīng)終點濃度的幾何平均值（λc）λc=lg-1 ∑X/4 )式中 X 為反應(yīng)終點濃度的對數(shù)值（lg）。反應(yīng)終點濃度是系列遞減的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素溶液中最后一個呈陽性結(jié)果的濃度。當(dāng)λc 在 0.03～0.125 EU/ml (包括 0.03 和 0.125 EU/ml)時，說明本次實驗細菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋正確，實驗的各種條件符合規(guī)定。此時方可計算待標(biāo)定、復(fù)核或仲裁的鱟試劑的靈敏度，并判斷其靈敏度是否符合要求。
【貯 藏】4℃以下。
注：鱟試劑國家參考品也可用于日常供試品的細菌內(nèi)毒素檢測，用于凝膠法時靈敏度為 0.06EU/ml，用于光度法時檢測限范圍為10~0.001EU/ml。
