生成夾心狀的抗體一抗原一抗體復(fù)合物，糖類抗原CA 50CA 125就用的其中的第三種方法（一步法）血清中的未知抗原與固相抗體和標(biāo)志抗體同時(shí)反應(yīng)。然后去除游離的標(biāo)志抗體，測(cè)固相抗體一抗原一標(biāo)志抗體復(fù)合物的放射性計(jì)數(shù)。
由于醫(yī)院收住著患有各種疾病的病人，醫(yī)院是病人集中的場(chǎng)所?？芍苯踊蜷g接地污染醫(yī)院環(huán)境。醫(yī)院的空氣、地面、用具、門、窗把手、水槽、水龍頭、醫(yī)療器械等皆可被病原微生物污染，甚至成為醫(yī)院內(nèi)感染微生物的儲(chǔ)菌所。
越來(lái)越多的醫(yī)院已經(jīng)認(rèn)識(shí)到污染的環(huán)境外表在傳達(dá)病原微生物上發(fā)揮了重要的作用。Goodman2008指出，近年來(lái)。病原體污染環(huán)境，通常發(fā)生在日常的醫(yī)療過(guò)程中。許多研究已經(jīng)描述了通過(guò)接觸污染的房間外表傳達(dá)病原體。Eckstein2007指出，感染或定植醫(yī)療相關(guān)病原體的病人，往往這些生物從他皮膚上脫落，并播散在環(huán)境中。盡管與病人直接接觸一般被認(rèn)為 醫(yī)護(hù)人員的手獲得病菌并隨后傳達(dá)給其他病人的主要來(lái)源，然而最近有幾項(xiàng)研究表明，受污染的環(huán)境外表也發(fā)揮著傳達(dá)病原體的重要作用。
標(biāo)志抗原與定量抗體結(jié)合的復(fù)合物就少，主要特點(diǎn)：標(biāo)志的抗原。其原理：未知抗原Ag+標(biāo)志抗原Ag+已知定量抗體Ab標(biāo)志抗原與抗體復(fù)合物AgA b+未知抗原與抗體復(fù)合物AgAb+游離標(biāo)志抗原Ag去除）未知抗原多。表示為負(fù)相關(guān)）
根據(jù)加樣順序與溫育次數(shù)的區(qū)別，臨床上甲胎蛋白（AFP癌胚抗原（CEA 8一微球蛋白（pzMG鐵蛋白（Fer人絨毛膜促性腺激素p亞單位（HCG-13等的檢測(cè)都是競(jìng)爭(zhēng)性RIA 法原理。競(jìng)爭(zhēng)性RIA 法。反應(yīng)方式分三種：平衡法，將非標(biāo)記抗原（被測(cè)物與標(biāo)準(zhǔn)品）抗體、標(biāo)志抗原依次加入反應(yīng)管，混勻后一次性溫育至反應(yīng)達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，再加分離劑分離B復(fù)合物）與F游離物）如：AFP8一MGFer順序加樣法，先將非標(biāo)記抗原（被測(cè)物與標(biāo)準(zhǔn)品）與抗體在反應(yīng)管內(nèi)作第一次溫育，待反應(yīng)達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡后。加入標(biāo)志抗原，再作第二次溫育后，分離B與F如：CEA 急診檢測(cè)法：為臨床急需檢測(cè)結(jié)果而提出的反應(yīng)方式，不等RIA 反應(yīng)達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡就終止反應(yīng)；分離劑的選擇有，PEG聚乙二醇）第二抗體等。
固相抗體先與未知抗原結(jié)合，從加樣測(cè)定順序上看。再與標(biāo)志抗體結(jié)合（正向兩步法）然后去除游離的標(biāo)志抗體，測(cè)固相抗體一抗原一標(biāo)志抗體復(fù)合物的放射性計(jì)數(shù)；未知抗原先與標(biāo)志抗體結(jié)合，再與同相抗體結(jié)合（反向兩步法）然后去除游離的標(biāo)志抗體，測(cè)固相抗體一抗原一標(biāo)志抗體復(fù)合物的放射性計(jì)數(shù)；未知抗原與固相抗體和標(biāo)志抗體同時(shí)反應(yīng)（一步法，又稱同時(shí)加樣法）然后去除游離的標(biāo)志抗體，測(cè)固相抗體一抗原一標(biāo)志抗體復(fù)合物的放射性計(jì)數(shù)。
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