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| DNA分子遺傳育種研究受到廣泛重視 | |||||||||||
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廣泛開展生物技術(shù)、慣例育種及多學(xué)科相結(jié)合的協(xié)同研究，為了不時滿足國內(nèi)外市場對不同專用花生品種的需求。為花生品種改良提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)理論與技術(shù)在不同物種、不同研究領(lǐng)域的快速發(fā)展與廣泛運用，今后在花生分子育種中應(yīng)重點加強以下研究：1將有效分子標志和其他遺傳標志以及激進育種相結(jié)合。充分發(fā)掘蘊藏于花生種質(zhì)資源中的遺傳多樣性；高密度遺傳圖譜構(gòu)建和重要性狀基因定位；應(yīng)用DNA 分子標志進行重要性狀輔助選擇育種；優(yōu)質(zhì)、抗逆基因工程技術(shù)與種質(zhì)創(chuàng)新利用：慣例育種技術(shù)和現(xiàn)代生物技術(shù)有機結(jié)合促進優(yōu)質(zhì)、抗性育種研究等。利用分子標志可以在DNA 水平上科學(xué)地選配育種親本，利用與重要目標性狀連鎖的分子標志可以對雜種后代進行科學(xué)選擇，加快選擇進度，提高育種效率，縮短育種時間。利用植物基因工程技術(shù)，可以打破物種間界線，改良現(xiàn)有花生品種和提供優(yōu)異變異種質(zhì)，加速優(yōu)質(zhì)、抗逆花生新品種（系)選育。
其遺傳育種研究一直受到廣泛重視。臨時以來，花生是世界范圍內(nèi)廣泛栽培的重要經(jīng)濟與油料作物。廣大花生育種工作者通過種質(zhì)資源收集、整理和篩選，運用雜交育種和系統(tǒng)育種等慣例育種方式，開展了入口型、加工型、油用型、營養(yǎng)型及抗逆型等專用花生新品種選育工作，取得了顯著成果。但是慣例育種方法普遍存在育種周期長、對目標單株的選擇效率低、利息高等缺點，制約了花生育種的深入開展。近年來，隨著分子遺傳學(xué)研究的不時深入，為花生遺傳改良提供了強有力的技術(shù)手段，展示出分子育種的誘人前景。
而種質(zhì)資源的遺傳多樣性及其親緣關(guān)系信息非常重要，利用分子標志技術(shù)研究種質(zhì)資源遺傳多樣性，對科學(xué)配置雜交組合具有重要的指導(dǎo)作用。目前，研究人員利用RA PDSSRAFLP等分子標志對花生種質(zhì)資源多樣性進行了深入分析,從種質(zhì)資源中發(fā)掘和利用優(yōu)異基因是實現(xiàn)突破性育種的關(guān)鍵。均可檢
其中7條發(fā)生多態(tài)性片段，RA PD標志Subramanian等利用48條RA PD引物檢測70份不同基因型的花生品種。占總引物的14.6%姜慧芳等應(yīng)用RA PD技術(shù)對7個花生品種進行了分析，所用的83個隨機引物中，13個引物的擴增產(chǎn)物顯示出不同品種之間的多態(tài)性。
揭示了不同花生品種具有較高的多態(tài)性。韓柱強等利用11對SSR引物對24個栽培花生品種分析,SSR標志Hopk等應(yīng)用6個多態(tài)性SSR引物,19份被鑒定的栽培花生種質(zhì)中出現(xiàn)了17條特征條帶。其中4對檢測到明顯的多態(tài)性,根據(jù)擴增結(jié)果可以將24個品種中的21個相互區(qū)分。最近,洪彥彬等采用110對SSR引物分析28份花生栽培種之間的遺傳差別,其中有46對引物在不同品種間檢測出2-9個等位基因，SSR聚類結(jié)果與根據(jù)形態(tài)特征的分類結(jié)果基本一致。
其中28對引物有多態(tài)性，累計檢測到111個多態(tài)性位點，每條引物平均有3.96個多態(tài)性條帶：進一步利用AFLP引物基本上將44份栽培種花生分為疏枝亞種和密枝亞種。陳強等對32個來源于中國不同產(chǎn)地的花生品種進行了AFLP指紋圖譜及相似性聚類分析，結(jié)果標明，所有供試花生品種的遺傳相似性為35%45%相似性水平上分為3個群，標明中國花生品種存在明顯的遺傳多態(tài)性。AFLP引物He等首次在花生上利用AFLP技術(shù)檢測到豐富的多態(tài)性,隨后利用64對AFLP引物檢測花生的栽培種。
可在分子水平上為生產(chǎn)中品種純度鑒定和品種知識產(chǎn)權(quán)維護提供依據(jù)。李雙鈴等利用AFLP標志對10個山東花生主栽品種進行了分析，利用花生品種間的DNA 多態(tài)性構(gòu)建分子指紋圖譜。9對引物組合共擴增出55條多態(tài)性條帶，并且至少兩對引物組合的配合可將這10個品種完全區(qū)分開。劉冠明等從64對SSR標志引物中篩選出4對，為南方花生主產(chǎn)區(qū)20個品種建立了指紋圖譜，該圖譜能使19個品種相互區(qū)分。
花生重要性狀分子水平的研究則相對落后。截至目前，相對于水稻、油菜等其他作物而言。關(guān)于花生重要性狀的分子標志和QTL定位主要集中在抗性方面。雷永等利用抗、感黃曲霉侵染的花生品種為親本配制雜交組合中花5號×J11以其F2分離群體為研究材料，采用AFLP技術(shù)和BSA 分析方法，獲得了與花生黃曲霉菌侵染抗性連鎖的2個分子標記，標志與抗性間的遺傳距離分別為8.8cM和6.6cM并進一步將其中的一個與抗性連鎖的AFLP標志轉(zhuǎn)化為更為實用的SCA R標志，該標志與花生黃曲霉侵染抗性間的遺傳距離為6.5cM任小平等利用抗、感青枯病的花生品種為親本配制雜交組合中花5號×遠雜9102構(gòu)建重組近交系，采用AFLP技術(shù)和BSA 分析方法，獲得2個與花生青枯病抗性連鎖的分子標志，標志與抗性間的遺傳距離分別為8.12cM和11.46cMHerselman等利用AFLP標志，采用BSA 法獲得花生矮化病毒病抗性基因連鎖的分子標志，并利用AFLP標志構(gòu)建了花生5個連鎖群，第一連鎖群上得到一個與抗性基因連鎖的標志，距離僅為3.9cM
目前多用于雜交后代的鑒定。殷冬梅等利用RA PD技術(shù)，分子標志輔助選擇在花生中應(yīng)用較少。對栽培種豫花4號與花生屬野生種A.villosa雜交后代9722F5進行了分子標志鑒定，結(jié)果標明，從60個隨機寡核苷酸引物中篩選出具有多態(tài)性的引物27個，其中一個引物（引物S364能檢測到來自野生種A.villosaDNA 特異性片段，說明野生種的某條染色體或某個部位轉(zhuǎn)入栽培種中。吳蘭榮等利用花生野生種A.cardenasii與栽培種鐵嶺四粒紅雜交，并以染色體加倍獲得雜種后代，經(jīng)多代自交選擇獲得新種質(zhì)材料8126應(yīng)用RA PD分子標志技術(shù)鑒定8126從76個引物中篩選出3個特異引物（OPE2OPF8OPF208126中穩(wěn)定地擴增出野生親本的特異譜帶，標明8126整合了野生親本的遺傳物質(zhì)，RA PD特異譜帶可以作為8126中野生親本A.cardenasii特異遺傳標志
提高花生抗性、改良品質(zhì)的一種有效手段，可以達到種質(zhì)創(chuàng)新利用的目的并有望進一步育成抗蟲、抗病、抗逆和優(yōu)質(zhì)花生新品種。抗性基因轉(zhuǎn)化目前，花生遺傳轉(zhuǎn)化的抗性基因主要包括抗蟲基因、抗病基因、抗旱基因等?；ㄉ蠎?yīng)用的天然抗蟲基因主要有Bt基因和CpTI基因。徐平麗等將抗蟲基因CpTI轉(zhuǎn)入花生，經(jīng)誘導(dǎo)分化獲得轉(zhuǎn)基因再生植株。PCR檢測及Southern雜交標明，外源基因CpTI已整合到大部分再生花生植株的基因組中；棉鈴蟲喂飼試驗表明，轉(zhuǎn)基因的花生植株具有一定的抗蟲性。番茄斑枯萎?。═swV核衣殼蛋白基因、花生條紋病毒(PStV外殼蛋白基因及幾丁質(zhì)酶基因是目前研究最多的抗病基因。Yang等用番茄斑枯萎?。═swV核衣殼蛋白質(zhì)基因包裹的微彈轟擊花生，獲得轉(zhuǎn)基因植株。轉(zhuǎn)基因花生后代在自然侵染病毒的情況下,利用基因工程技術(shù)將外源基因?qū)牖ㄉ蚪M。與非轉(zhuǎn)基因的花生比擬，斑萎病的發(fā)病率降低。Higgin等將兩種形式的PStV外殼蛋白基因(一是發(fā)生移碼的不能正常翻譯的全長序列CP2二是氨基端截短但可編碼CP基因CP4分別轉(zhuǎn)入花生胚性愈傷組織，并通過潮霉素篩選獲得抗性轉(zhuǎn)基因植株、攜帶CP2和CP4轉(zhuǎn)基因植株均未檢測到蛋白質(zhì)表達，但都具有PStV抗性。最近，Bhatnagar-Mathur等將由rd29A 基因的脅迫誘導(dǎo)啟動子驅(qū)動的擬南芥轉(zhuǎn)錄因子基因DREB1A 導(dǎo)入干旱敏感型花生，檢測到有DREBlA 表達的轉(zhuǎn)基因植株生長正常，并具有明顯的干旱誘導(dǎo)抗性。
控制子粒油酸、亞油酸含量和二者比值的關(guān)鍵酶。利用反義轉(zhuǎn)基因技術(shù)和RNA i基因緘默技術(shù)，品質(zhì)改良基因轉(zhuǎn)化油酰去飽和酶FA D2催化油酸在碳12位脫氫生成亞油酸?？捎行б种艶A D2基因的轉(zhuǎn)錄，提高油酸含量。目前國外許多實驗室都在開展花生脂肪酸含量和組成改良方面的研究。Yin等構(gòu)建了含有FA D2基因激進區(qū)的hpRNA 基因緘默表達載體。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化法獲得了2l株轉(zhuǎn)基因植株，檢測結(jié)果標明，轉(zhuǎn)基因植株種子油酸含量較非轉(zhuǎn)基因植株明顯增加，其中增加最高的油酸含量可達總脂肪酸含量的70%而非轉(zhuǎn)基因植株種子油酸含量只增加到37.93%
國內(nèi)外在花生分子標志、轉(zhuǎn)基因等現(xiàn)代分子生物學(xué)領(lǐng)域已取得較大研究進展，目前。但從國際范圍看，花生分子育種的研究明顯落后于其他作物，許多問題有待于進一步研究和解決。例如，花生分子標志技術(shù)多限于種質(zhì)資源遺傳多樣性分析，而重要農(nóng)藝性狀QTL定位、分子標志輔助選擇研究尚未深入開展，某些技術(shù)體系還處于探索階段；雖然花生轉(zhuǎn)基因研究進展較大，但生產(chǎn)中真正推廣應(yīng)用的抗性品種尚不多見。
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