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		親和傳感器探測到的選擇性結(jié)合單元之間的偶聯(lián)

　　親和傳感器探測到的選擇性結(jié)合單元（SBU）之間的偶聯(lián)反應(yīng)（例如，抗生物素蛋白，抗體，單鏈DNA，凝集素，和主機(jī)的人工分子識別物種）和與其互補(bǔ)的組件（例如，生物素，抗原，互補(bǔ)的單鏈DNA，糖序列和來賓目標(biāo)化合物）。親和傳感器的設(shè)計，確保有約束力的SBU和補(bǔ)傳感器表面上發(fā)生。因此，該傳感器是隱式異構(gòu)。換能器轉(zhuǎn)換成可測量的響應(yīng)綁定事件。

　　該傳感器可分為兩類：nonlabeled和標(biāo)記。標(biāo)注型的親和力傳感器直接檢測親和復(fù)雜，在形成復(fù)合物誘導(dǎo)的傳感器通過測量物理變化。相反，標(biāo)記的親和傳感器包括一個靈敏檢測的標(biāo)記物，和的親和性配合物的存在下通過測量標(biāo)簽，然后確定。通常情況下，檢測到的結(jié)合事件是不是一個直接測量。標(biāo)簽SBU或補(bǔ)充輔助信號綁定事件。酶標(biāo)記物是特別有用的，用于提供信號放大。其成立得到更高的靈敏度。由于酶電極安培檢測有效耦合氧化還原酶，是一個自然的過程耦合，酶標(biāo)記的親和反應(yīng)，安培檢測。

　　海涅曼率先使用堿性phosphataseantibody的共軛物進(jìn)行夾心免疫10在這些實驗中，使用氨基苯基磷酸酯（中取代硝基苯磷酸）作為底物，并用流動注射分析系統(tǒng)中被檢測到陽極氨基苯酚產(chǎn)品澤設(shè)計主機(jī)的傳感器采用了經(jīng)典的Clark-O型2電極為基傳感器和過氧化氫 ??酶作為酶標(biāo)記11過氧化氫 ??酶用于分解H 2 O 2與O 2和H 2 O。當(dāng)酶的標(biāo)簽固定在傳感器表面上的親和反應(yīng)，增加O 2的信號中觀察到的H 2 O 2溶液。rishpon鮑迪倫，和其他人已經(jīng)開發(fā)出結(jié)合的酶標(biāo)記物和在電極表面的固定化親和成分的親和力電極傳感器1215雖然得到了優(yōu)異的敏感性而受到阻礙，這些檢測方法需要洗工作電極和更改孵化和測試解決方案。的主要問題是難以區(qū)分的酶催化反應(yīng)從表面相關(guān)的反應(yīng)溶液的體積。

　　親和力傳感器工程師的一個目標(biāo)一直發(fā)展nonseparation方法是沒有必要的洗滌步驟（源不重現(xiàn)）。段和麥耶霍夫在最近的一篇文章中，提出了一種方案，其中被帶進(jìn)細(xì)胞，從后面的電極基板，被轉(zhuǎn)換成電活性產(chǎn)物，16這種方法使測量的結(jié)合反應(yīng)，無需通常的洗滌步驟。然而，一個特別設(shè)計的細(xì)胞和電極是必要的。

　　有線酶親和生物傳感器在此之前，描述敏感? 2 ? 2建通過共價鍵固定化辣根過氧化物酶的氧化還原水凝膠中的電極1,2的氧化還原水凝膠形成HRP和水溶性聚（乙烯基吡啶）的季銨化的部分與2 -溴乙胺和部分與鋨聯(lián)吡啶氧化還原中心（PVP-NH 2 -輸出端），和交聯(lián)的聚（乙二醇二縮水甘油醚）玻璃碳上，對H 2 O 2的電催化減少圖1中所示的序列，這些電極的靈敏度是非常高的：1厘米2 M 1。H 2 ? 2的電催化觀察與少1微克/厘米2 HRP納入水凝膠。通過添加微量的HRP的催化性能的水凝膠的改性導(dǎo)致的特異性結(jié)合的HRP標(biāo)記的親和試劑的電極可以選擇性地檢測和，將所得的安培的親和力傳感器將不需要洗滌或分離的情況的假設(shè)試劑。

　　這一假說的基礎(chǔ)上，快速，緊湊，價格低廉，無分離安培為生物素抗生物素蛋白和抗生物素蛋白親和傳感器8的傳感器，通過固定化一個SBU（抗生物素蛋白）到一個三維的電子進(jìn)行氧化還原水凝膠（酶布線構(gòu)造）3-mm的玻璃碳電極。本SBU SBU的互補(bǔ)成分（生物素）的電極親和力。其互補(bǔ)成分的親和傳感器的溫育導(dǎo)致補(bǔ)體從溶液中選擇性吸收。如果補(bǔ)第一標(biāo)記與氧化還原酶，溫育導(dǎo)致以結(jié)合該內(nèi)切酶在電極上的布線凝膠。示意性地在圖2中，在這樣的傳感器的抗生物素蛋白-生物素系統(tǒng)的原理檢測。

　　使用生物素/抗生物素蛋白親和電極直接檢測試驗樣品中（在圖2中圖示說明，路徑A）氧化還原enzymelabeled補(bǔ)。這里的抗生物素蛋白被固定在水凝膠中的電極，和共軛的生物素標(biāo)記的POD的氧化還原酶。在該方法中，親和傳感器含有氧化還原標(biāo)記的補(bǔ)體（B-HRP）的溶液中溫育。結(jié)合的補(bǔ)體選擇性地固定在水凝膠中的氧化還原酶。此外，氧化還原酶的底物，生成上面的電極檢測到的電信號?！　D。直接轉(zhuǎn)導(dǎo)的生物素化的辣根過氧化物酶（B-HRP），抗生物素蛋白（X），和生物素濃度（*）在PVI-輸出端的“線”和抗生物素蛋白修飾電極的電流。當(dāng)B-辣根過氧化物酶結(jié)合的抗生物素蛋白HRP-布線水凝膠（A）中，電流流過。電流被抑制，如果（B）的B-HRP結(jié)合到表面的抗生物素蛋白，而不是溶解，或（C）游離生物素的布線水凝膠中的抗生物素蛋白的結(jié)合位點被占用。
對照品

　　在POD的標(biāo)簽的情況下，上面的電極產(chǎn)生的電子中繼過氧化物酶通過抗生物素蛋白過氧化物酶（POD）的選擇性結(jié)合的水凝膠網(wǎng)絡(luò)。在酶的底物H 2 O 2的存在下，電子被轉(zhuǎn)移減少過氧化物酶（POD），過氧化氫 ??，生成的電流的流動。該電流是一個函數(shù)的濃度的生物素化過氧化物酶固定在電極上，由本SBU。如圖3所示，電子從電極通過導(dǎo)線和過氧化物酶的H 2 O 2，這是electroreduced水中繼。測量一般是在100毫伏（Ag / AgCl電極）。PVI-輸出端是用聚乙烯基咪唑骨干和鋨聯(lián)吡啶氧化還原位點20％的咪唑基配位聚合物。PVI-OS提供了相同的氧化還原布線功能，PVP-OS-NH 2。

　　圖。電流注入H 2 O 2后，協(xié)調(diào)鋨聯(lián)吡啶（PVI-輸出端）電極（2微克抗生物素蛋白，3.3微克PVI輸出端，和0.83微克的聚乙二醇二縮水甘油基醚[PEGDGE]）的抗生物素蛋白-改性的聚乙烯基咪唑的時間依賴100μM和1μg/ ml的濃度注射B-HRP。條件：5毫升PBS，1000 RPM; +0.1 V的Ag / AgCl。

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