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    1,2 - 二氧雜環(huán)丁烷基板的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)
          
      可以進(jìn)行各種堿性磷酸酯酶的反應(yīng)底物的能力,以便能夠提供高靈敏度地檢測(cè)與許多的測(cè)定格式和儀器平臺(tái)。:阮若佐榮,布魯克斯拉里J. Kricka,科琳娜EM Olesen說(shuō),愛德華茲,約翰·C·Voyta酒店,伊雷娜布朗斯坦用堿性磷酸酯酶(AP)的酶標(biāo)記物的1,2 - 二氧環(huán)乙烷的化學(xué)發(fā)光底物的使用提供了眾多的免疫檢測(cè)和核酸檢測(cè)用格式的高靈敏度檢測(cè)。目前的應(yīng)用包括基于膜的蛋白質(zhì)和核酸的檢測(cè),免疫測(cè)定,基于微孔板的核酸檢測(cè),越來(lái)越多的基于陣列的檢測(cè)。
      二氧環(huán)乙烷的四元環(huán)的環(huán)狀過(guò)氧化物熱穩(wěn)定的1,2 -二氧環(huán)乙烷分子實(shí)際上是穩(wěn)定的氧化反應(yīng)中的中間體合成的可能性已被證明有牽連的短命的,不穩(wěn)定的中間體,在氧化反應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。。
      金剛烷基-1,2 -二(氧雜環(huán)丁烷),堿性磷酸酯酶的直接底物的磷酸鹽已被成功地用于的bioanalyte和內(nèi)切酶檢測(cè)。金剛烷基-1,2 -二氧環(huán)乙烷磷酸底物水解的去磷酸化,由AP導(dǎo)致形成亞穩(wěn)的陰離子,該片段進(jìn)一步以形成激發(fā)態(tài)的發(fā)射光(參見圖1)的陰離子。二(氧雜環(huán)丁烷)的酚鹽陰離子分解通過(guò)化學(xué)發(fā)起的電子交換發(fā)光(CIEEL)機(jī)制。2從苯酚中的電荷轉(zhuǎn)移到的二氧雜環(huán)丁烷環(huán)促進(jìn)的環(huán)狀過(guò)氧化物裂解,釋放出約100千卡化學(xué)激發(fā)所得到的羰基的片段的單電子狀態(tài)。這激發(fā)物種在477 nm處發(fā)光,因?yàn)樗謴?fù)到基態(tài)。
      圖1。1,2 - 二氧環(huán)乙烷的AP底物的發(fā)光機(jī)制。
    1,2 - 二氧環(huán)乙烷的AP底物的發(fā)光機(jī)制。
      對(duì)AP-催化的二氧環(huán)乙烷分解反應(yīng)獲得的光發(fā)射是一個(gè)穩(wěn)定的狀態(tài),從而可以使用幾種不同的成像平臺(tái),用于信號(hào)檢測(cè)的輝光。這些措施包括光電倍增管和光電二極管光度計(jì),X光膠片,感光膠片,熒光屏,弱光敏感電荷耦合器件(CCD)技術(shù)的基礎(chǔ)上使用相機(jī)和儀器儀表系統(tǒng)。
      已被合成一個(gè)家庭的1,2 - 二氧環(huán)乙烷基片對(duì)AP提供特殊增強(qiáng)的性能特性(參見圖2)。AMPPD,CSPD,CDP和的CDP明星基板銷售Tropix(貝德福德,MA)在本文后面討論。物L(fēng)umigen PPD,LUMI捷,捷光530,此外,捷光物L(fēng)umigen公司(密西根州Southfield),氧雜環(huán)丁烷納入的AMPPD分子的配方,包括增強(qiáng)劑。此外,1,2 - 二氧雜環(huán)丁烷的其他水解酶,包括β-半乳糖苷酶和β-糖苷酶,底物都可用。
      圖2。一些1,2 - 二氧環(huán)乙烷的AP底物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
    一些1,2 - 二氧環(huán)乙烷的AP底物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
      大分子增強(qiáng)劑的加入顯著提高了發(fā)光強(qiáng)度所產(chǎn)生的1,2 -二氧環(huán)乙烷,3,4在水溶液中的質(zhì)子轉(zhuǎn)移事件產(chǎn)生千分之一在有機(jī)溶劑中得到的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度。但是提高的水溶性季胺聚合物在水溶液中反應(yīng)約100倍的光發(fā)射。其它聚合物的配方含有熒光素作為能量轉(zhuǎn)移的受體,進(jìn)一步提高光的產(chǎn)率和轉(zhuǎn)移的最大發(fā)射波長(zhǎng)為540 nm。的熒光膠束增強(qiáng)系統(tǒng),是由十六烷基三甲基溴化銨和熒光能量轉(zhuǎn)移的受體增加化學(xué)發(fā)光效率400倍。本文討論了1,2 - 二氧環(huán)乙烷為基礎(chǔ)的檢測(cè)技術(shù)和能力的技術(shù)。
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