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		細(xì)胞捕獲使用顯微鏡瘧疾檢測使用過濾樣品制備

　　瘧疾是一種熱帶疾病,影響超過世界人口的40%。根據(jù)2005年世界衛(wèi)生組織的報(bào)告,瘧疾威脅32億人,與3.5億年至5億年情況下導(dǎo)致每年150萬到270萬人的死亡。 6 目前,主要方法檢測瘧疾是一個(gè)訓(xùn)練有素的操作者觀察血涂片。觀察血涂片檢查是一種特殊的活動(dòng),需要大量的操作培訓(xùn)。使用血液涂片也遲鈍:寄生蟲濃度的20000年到30000年每毫升寄生蟲(p /毫升)的全血需要準(zhǔn)確的診斷。 7

　　一個(gè)多井板與一個(gè)雙層的玻璃光纖紅色細(xì)胞富集材料可以隔離紅細(xì)胞從大量的人類DNA。 8 消除了人工DNA存在于白細(xì)胞結(jié)果的能力檢測低濃度的寄生蟲和聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),而不是使用PCR在整個(gè)人類的血液。最低檢出限為實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(rt - PCR)對全血是大約1000 p /毫升。 9 然而,通過去除dna含有細(xì)胞的敏感性增加到大約?rt - pcr是imately 20 p /毫升。

　　通過使用一個(gè)filterplate,紅色細(xì)胞迅速寄生蟲包含分離細(xì)胞含有人類DNA。因此背景信號(hào)觀察到明顯低于傳統(tǒng)PCR反應(yīng)中觀察到的信號(hào)對人體血液。這樣的低信號(hào)允許更多疾病的快速診斷與少的機(jī)會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果。能夠降低最低檢測限度通過分離細(xì)胞PCR擴(kuò)增前可以應(yīng)用在其他方面比瘧疾。在任何應(yīng)用程序中,靶細(xì)胞小于人類白細(xì)胞、凈化目標(biāo)細(xì)胞的興趣應(yīng)該是可能的。隨后的細(xì)胞裂解和PCR應(yīng)該然后導(dǎo)致敏感性增強(qiáng)。

　　細(xì)胞捕獲使用顯微鏡使用纖維媒體導(dǎo)致細(xì)胞被困在矩陣的媒體。然而,如果細(xì)胞對內(nèi)膜或恢復(fù),一個(gè)深度過濾是無效的。相反,一個(gè)真正的表面捕捉過濾器(例如。 ,該顯微鏡)是最好的方法,這樣的目的。

　　該顯微鏡是薄聚合物電影圓柱孔穿過他們的深度(見圖2 )。在顯微鏡的毛孔有既定的直徑,是精確控制。通常,孔隙大小分布對該顯微鏡是+ 0 / -20%來自聲稱的名義孔隙大小、孔隙大小可以用技術(shù),如掃描電子顯微鏡(SEM)。孔隙大小的引用是最大的粒子可以通過,這與鑄膜(如。、硝基、PVDF、尼龍、PES等)中,沒有定義良好的孔隙(見圖2 )。

　　鑄膜的結(jié)構(gòu)類似于“開放的我們稱之為泡沫(即。 ,液泡與支墻),緊固細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)一起長軟管和連鎖的肋骨,分散在三個(gè)維度”。 10 可以看出,“孔隙直徑從而沒有直接關(guān)系的大小的顆粒被過濾,因?yàn)槊讓?shí)際上是裂隙形狀而不是圓形。” 11

　　情況變得更復(fù)雜,因?yàn)樗Q的孔隙大小是基于測量的物理屬性(如。 ,泡點(diǎn))。實(shí)際的尺寸的顆粒被過濾因此可以非常不同的孔隙大小的一個(gè)演員稱膜。

　　幾年來,能夠?qū)ｉT隔離一個(gè)特定的細(xì)胞類型基于尺寸用于微生物學(xué)和癌癥檢測。然而,這種能力擴(kuò)展到隔離病毒顆粒從細(xì)胞的組件的全血可以有顯著的影響,特別是在分子診斷。

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