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		表征菌株在體外細(xì)胞培養(yǎng)傳播或體內(nèi)動(dòng)物宿主

　　連續(xù)稀釋這些隔離在DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基被發(fā)現(xiàn)在FTA卡。 6毫米,一夜之間被eluted拳在300 -?l DMEM培養(yǎng)基在4°C。 RNA提取自大約150?l洗出液的使用病毒RNA迷你工具包的試劑盒NV(Venlo、荷蘭)。特定的病毒RNA狂犬病病毒檢測是通過一個(gè)嵌套的rt - pcr過程。

　　病毒滅活試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),干燥病毒到FTA卡2小時(shí)呈現(xiàn)病毒完全不活動(dòng),這是很重要的在田間采集標(biāo)本時(shí)。安全處理的標(biāo)本為分子檢測和他們作為biohazardous解密材料是關(guān)鍵因素。滅活病毒促進(jìn)海運(yùn)樣品回去給一個(gè)中央測試設(shè)施。

　　當(dāng)產(chǎn)品的rt - pcr過程在瓊脂糖凝膠分離、擴(kuò)增片段給樂隊(duì)的預(yù)期大小與冷凍病毒相比。此外,測序的產(chǎn)品從一個(gè)病毒rt - pcr擴(kuò)增在自貿(mào)區(qū)給大于99%的序列同源性,一個(gè)冷凍病毒,目前公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)。

　　病毒RNA完全穩(wěn)定在一個(gè)環(huán)境溫度43天。這樣的穩(wěn)定和簡單的收集樣品允許少量的biohazardous材料從活的動(dòng)物是收集流行病學(xué)研究和確定疾病的傳播途徑。

　　最近的一個(gè)調(diào)查的豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)用FTA卡來檢測病毒水平全血使用簡化的過程。 15 在這項(xiàng)研究中,一個(gè)活病毒被稀釋在無菌生理鹽水或全血來確定檢測參數(shù)。在實(shí)際測試中,仔豬血液樣本檢測PRRSV的存在。

　　該研究提出了一項(xiàng)協(xié)議的rt - pcr分析,在自由貿(mào)易協(xié)定在不提取PRRSV病毒DNA從自由貿(mào)易協(xié)定的磁盤。該方法使用固定的RNA,通過治療,自貿(mào)區(qū)矩陣酚醛的解決方案。 16 PCR抑制劑和細(xì)胞碎片被沖走,RNA仍然綁定到自貿(mào)區(qū)矩陣對原位合成第一鏈的互補(bǔ)。一個(gè)整除的cDNA過一個(gè)rt - pcr檢測PRRSV。逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA捕捉到的資料是相同的積極自由貿(mào)易區(qū)卡控制病毒RNA純化的傳統(tǒng)方式除了慣常的?。

　　在與他人合作的領(lǐng)域,Ambion Inc。(奧斯汀,得克薩斯州)用FTA卡捕捉西尼羅河病毒(西尼羅河病毒)從大腦tis?蘇和口腔拭子從鳥類和檢測牛瓶腹瀉病毒(BVDV)在整個(gè)牛血。這種病毒被捕獲并穩(wěn)定在FTA卡運(yùn)輸回中央獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室,提取病毒RNA從卡使用MagMax Ambion系統(tǒng)。

　　在基本的癌癥和臨床監(jiān)測研究,檢測疾病生物標(biāo)志物是無價(jià)的確定目標(biāo)藥物發(fā)現(xiàn)和嚴(yán)重程度和階段的癌癥進(jìn)展。存在和水平的基因生物標(biāo)記也可以與預(yù)后的疾病的過程。例如,如果特定的生物標(biāo)記物(如。、循環(huán)DNA或細(xì)胞突變致癌基因)含活性可能與一個(gè)特定的疾病表型(如。、開發(fā)的轉(zhuǎn)移性癌癥從局部腫瘤)、分子診斷測試可以幫助治療決定一個(gè)特定的病人。

　　通過實(shí)驗(yàn)和人口研究的癌癥患者與高轉(zhuǎn)移潛能,這種相關(guān)性可能是發(fā)達(dá),成為統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這類研究可以識(shí)別子集的患者的治療方案是咄咄逼人,不讓他人不必要的接觸化療?治療藥物。

　　自由貿(mào)易協(xié)定已被應(yīng)用在一些臨床研究基因生物標(biāo)記對腫瘤進(jìn)展在黑色素瘤乳腺癌lympho?增生性疾病和上aerodigestive束癌癥。月17日至22日在這些研究中,微型衛(wèi)星作為生物標(biāo)記物。微衛(wèi)星改變包括損失的雜合性(LOH)等位基因的失調(diào),和突變。在一項(xiàng)研究中,酒精中毒患者和健康志愿者為乙醇脫氫酶1基因分型c * 1(ADH1C * 1)等位基因來確定該基因的作用在腫瘤的形成。

　　此外,全血樣品非常適合自由貿(mào)易區(qū)建立DNA純化自完整細(xì)胞是最好的樣本類型自由貿(mào)易協(xié)定的過程。當(dāng)接觸到自由貿(mào)易區(qū)化學(xué)涂布矩陣、完整的細(xì)胞迅速溶化,DNA被困(身體,而化學(xué))在纖維在矩陣。蛋白質(zhì)、核酸酶、微生物生物化學(xué)滅活的自由貿(mào)易協(xié)定,自由基陷阱保護(hù)DNA免受損害在室溫下很長一段時(shí)間。生物樣品的收集在自由貿(mào)易協(xié)定提供了三個(gè)優(yōu)勢。首先,歸檔的樣品可以回顧新疾病生物標(biāo)志物的研究開發(fā)。第二,室溫存儲(chǔ)已節(jié)省空間的效率。第三,樣品可以在護(hù)理點(diǎn)收集和運(yùn)送到一個(gè)中央分子診斷實(shí)驗(yàn)室通過郵件沒有特殊處理要求。

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