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		傳感器檢測之間的偶聯(lián)反應(yīng)選擇性綁定單元

　　如。技術(shù)、抗生物素蛋白抗體,單鏈DNA,凝集素和人工分子識(shí)別主機(jī)物種)及其配套組件(比如。技術(shù),生物素,抗原,互補(bǔ)的單鏈DNA,糖序列,和客人目標(biāo)化合物)。親和力傳感器的設(shè)計(jì)確保綁定業(yè)務(wù)單位和補(bǔ)充發(fā)生在傳感器表面。因此傳感器是隱式異構(gòu)。傳感器將綁定事件轉(zhuǎn)換成可測量的響應(yīng)。

　　傳感器可分為兩類:nonlabeled和標(biāo)簽。 Nonlabeled親和力傳感器直接檢測關(guān)聯(lián)復(fù)雜在傳感器通過測量生理變化引起的復(fù)雜的形成。相反,標(biāo)記親和傳感器將敏感檢測標(biāo)簽,和親和力的存在復(fù)雜然后通過測量確定的標(biāo)簽。

　　通常情況下,檢測綁定事件并不是一個(gè)直接測量。標(biāo)簽在布或補(bǔ)充艾滋病在信號(hào)綁定事件。提供信號(hào)放大酶標(biāo)簽尤其有用。他們公司收益率更高的靈敏度。因?yàn)槊鸽姌O與測量電流的有效耦合的氧化還原酶檢測,有自然進(jìn)程耦合enzyme-labeled親和反應(yīng)和測量電流的檢測。

　　海涅曼率先使用堿性磷酸酶?抗體軛合物執(zhí)行夾心免疫測定。 10 在這些化驗(yàn),aminophenyl磷酸作為襯底(代替nitrophenyl磷酸鹽)和氨基酸產(chǎn)品檢測anodically流動(dòng)注射分析系統(tǒng)。

　　Aizawa設(shè)計(jì)了一系列傳感器和傳統(tǒng)Clark-type O 2 電極作為基傳感器和過氧化氫酶的酶標(biāo)簽。 11 過氧化氫酶用于分解H 2 O 2 來啊 2 和h 2 O .固定化酶標(biāo)簽時(shí)在傳感器表面的親和反應(yīng),增加O 2 信號(hào)是觀察H 2 O 2 解決方案。

　　Rishpon,鮑迪倫。這兩位和其他發(fā)達(dá)electrode-based親和力傳感器將標(biāo)簽和親和力的固定化酶在電極表面組件。 12?15 雖然獲得了優(yōu)秀的敏感性,這些阻礙了化驗(yàn)需要洗工作電極和改變孵化和測試解決方案。主要問題是很難區(qū)分本體溶液中酶催化反應(yīng)和surface-associated反應(yīng)。

　　親和力傳感器工程師的目標(biāo)一直nonseparation的發(fā)展方法,清洗步驟(非再生性的來源)是完全沒有必要的。在最近的一篇文章中,段和襯底Meyerhoff提出一項(xiàng)計(jì)劃,即轉(zhuǎn)化為電活性產(chǎn)品,被帶入細(xì)胞從電極后面。 16 這種方法允許綁定測量反應(yīng)不常見的洗滌步驟。然而,一個(gè)特別設(shè)計(jì)的細(xì)胞和電極是必要的。

　　Wired-Enzyme親和力生物傳感器

　　此前,敏感H 2 O 2 在氧化還原電極由共價(jià)固定合水凝膠。 1、2 合的氧化還原水凝膠形成和水溶性聚(乙烯基吡啶)quaternized部分2-bromoethylamine和部分鋨聯(lián)氧化還原中心(PVP-NH 2 -Os)和交聯(lián)聚乙二醇縮水甘油醚)在玻璃碳。

　　這些電極的靈敏度,H 2 O 2 是electrocatalytically減少序列如圖1所示,非常高:1厘米嗎 ?2 米 ?- 1 。催化電解還原H 2 O 2 觀察只要1?g /厘米嗎 2 合等納入水凝膠。修改的催化行為添加微量水凝膠的合了假設(shè)的具體綁定HRP-labeled親和試劑可以選擇性地檢測電極,產(chǎn)生的測量電流的親和力傳感器不需要洗或分離試劑。

　　基于這一假設(shè),快,緊湊,便宜,而且separation-free安培計(jì)的親和力傳感器開發(fā)的生物素和抗生物素蛋白。 8 傳感器是由固定的業(yè)務(wù)單位(卵白素)轉(zhuǎn)換為三維電子導(dǎo)電氧化還原水凝膠(酶連接)3-mm玻璃碳電極。業(yè)務(wù)單位提供了電極親和力為單位的補(bǔ)充組件(生物素)。孵化的親和力傳感器的互補(bǔ)組件導(dǎo)致選擇性吸收的補(bǔ)充方案。如果補(bǔ)充第一次用一種氧化還原酶標(biāo)記,孵化了綁定的酶電極上的布線凝膠。在這樣一個(gè)傳感器檢測的原則提出了avidin-biotin系統(tǒng)示意圖如圖2所示。

　　圖2。直接轉(zhuǎn)導(dǎo)biotinylated-HRP(B-HRP)、抗生物素蛋白(X)和生物素(*)濃度在PVI-Os電流“線”和avidin-modified電極。當(dāng)B-HRP與親和素結(jié)合HRP-wiring水凝膠(A),電流流動(dòng)。當(dāng)前是抑制如果(B)B-HRP綁定到溶解而不是表面抗生物素蛋白或(C)連接水凝膠的抗生物素蛋白的結(jié)合位點(diǎn)被免費(fèi)的生物素。

　　生物素/抗生物素蛋白親和力電極用于直接檢測氧化還原酶?標(biāo)記補(bǔ)充在測試樣本(繪畫般地描述在圖2中,路徑)。這里的抗生物素蛋白固定在水凝膠電極,和共軛POD氧化還原酶的生物素標(biāo)記。在這種方法中,孵化了親和力傳感器解決方案包含redox-labeled補(bǔ)充(B-HRP)。綁定的補(bǔ)充選擇性固定氧化還原酶在水凝膠。添加氧化還原酶底物產(chǎn)生一個(gè)電信號(hào)檢測電極。

　　POD的標(biāo)簽,電子在電極傳遞到生成POD酶通過水凝膠網(wǎng)絡(luò)的豆莢是選擇性地受抗生物素蛋白。在酶的底物 2 O 2 然后,電子從減少艙轉(zhuǎn)移到過氧化氫,產(chǎn)生電流的流動(dòng)。當(dāng)前是一個(gè)函數(shù)的濃度的生物素化的過氧化物酶固定化電極的單位。如圖3所示,通過線電極的電子傳遞和POD酶H 2 O 2 ,electroreduced水。測量通常在+ 100 mV(Ag)/ AgCl)。 PVI-Os是聚合物polyvinylimidazole骨干和鋨聯(lián)氧化還原網(wǎng)站協(xié)調(diào)咪唑組的20%。 PVI-Os PVP-Os-NH氧化還原布線功能一樣 2 。

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