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購(gòu)買(mǎi)時(shí)請(qǐng)注意選擇相應(yīng)的產(chǎn)品名稱(chēng)

		基因組學(xué)已經(jīng)被診斷LabCD盤(pán)發(fā)展的焦點(diǎn)

　　成套o(hù)n-disc方法開(kāi)發(fā)了DNA提取、PCR擴(kuò)增,質(zhì)粒制備、和SNP檢測(cè)(見(jiàn)表2)。例如,圖8顯示了LabCD盤(pán)用于質(zhì)粒DNA隔離。樣品進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),通過(guò)一系列的移動(dòng)渠道,計(jì)量閥,過(guò)濾器來(lái)溶解和分離DNA。

　　在一系列的實(shí)驗(yàn)中,大腸桿菌LabCD盤(pán)結(jié)果與萃取相比使用迷你工具包的質(zhì)粒提取試劑盒(Venlo、荷蘭)。 5-?l文化樣本應(yīng)用于閥瓣,和不同階段的溶菌作用,洗滌、過(guò)濾和收集提取的DNA進(jìn)行旋轉(zhuǎn)計(jì)劃從300 rpm,最后900 rpm超過(guò)10分鐘。由此產(chǎn)生的DNA被使用與plasmid-specific PCR引物從閥瓣和放大,Qiagen-extracted與擴(kuò)增的DNA。 DNA凝膠電泳的放大顯示,LabCD方法匹配的DNA提取試劑盒包(參見(jiàn)圖9)。凝膠上的DNA帶的身份建立了放大和運(yùn)行一個(gè)已知(購(gòu)買(mǎi))質(zhì)粒的樣品。

　　四個(gè)人質(zhì)粒隔離單位可以放置在一個(gè)LabCD盤(pán)。與其他LabCD化驗(yàn),LabCD質(zhì)粒盤(pán)需要較少的樣本和試劑卷比當(dāng)前DNA提取所需的方法。這LabCD也可以更快地完成提取,在自動(dòng)sample-in,product-out格式。

　　LabCD發(fā)展的質(zhì)粒為基因組DNA的隔離閥瓣和修改光盤(pán)從血液導(dǎo)致發(fā)展的總DNA提取、PCR擴(kuò)增盤(pán):LabCD-PCR加上圓盤(pán)。這個(gè)LabCD可以包含16 DNA提取和放大單元通過(guò)使用5 - 10?l樣品(如。標(biāo)準(zhǔn)品、血、文化等),20到30分鐘可以完成整個(gè)過(guò)程,根據(jù)PCR的循環(huán)次數(shù)。許多研究已經(jīng)描述了這盤(pán)的設(shè)計(jì)和功能。 6、9、10

　　樣品(5?l)的文化或生物流體應(yīng)用于閥瓣。使用專(zhuān)用旋轉(zhuǎn)計(jì)劃,10毫米的5?l樣品細(xì)胞溶解在氫氧化鈉在95°C 1分鐘釋放DNA和蛋白質(zhì)變性。 5?l的DNA溶液中和16毫米tris-HCl(pH值7.5),和混合的8 - 10?l PCR試劑和底漆。盤(pán)上的DNA是放大與熱敏電阻加熱元件在一個(gè)旋轉(zhuǎn)的滾筒包含兩個(gè)每個(gè)分析熱電裝置。閥瓣可以容納16個(gè)人微流體結(jié)構(gòu),允許16同時(shí)放大反應(yīng)。

　　圖10。 ( 點(diǎn)擊放大 )On-disc大腸桿菌基因組DNA的提取和放大。 disc-amplified DNA完全相同的DNA放大使用標(biāo)準(zhǔn)thermocycler方法。

　　在一個(gè)例子中,2 -或10-?l樣本的DNA(8××103或103細(xì)胞)提取的大腸桿菌在盤(pán)上。 PCR擴(kuò)增進(jìn)行使用漆底漆,目標(biāo)422 - bp lac我阻遏蛋白序列編碼,和EcoCtl底漆,放大一個(gè)隨機(jī)選擇的300 - bp序列。 On-disc放大使用變性步驟(95°C,2分鐘)和35放大周期(退火60°C 30秒,在72°C擴(kuò)展30秒,30秒和變性在95°C)。盤(pán)的放大DNA被發(fā)現(xiàn)和分析使用ethidium bromide-stained瓊脂糖凝膠電泳。 on-disc放大DNA與臺(tái)式放大用ptc - 100 Thermocycler MJ研究(沃爾瑟姆,MA)(見(jiàn) 圖10 )。

　　微流體提供了一種新方法的快速分析臨床和藥物分析物在各種排列和多路復(fù)用格式集成樣品制備,試驗(yàn)和最終產(chǎn)品檢測(cè)在同一個(gè)平臺(tái)。微流體分析的低量和快速的反應(yīng)時(shí)間可以減少成本和昂貴的試劑,樣品制備和分析的復(fù)雜性。微流控分析平臺(tái)的主要挑戰(zhàn)是制造成本和可再生的性能。克服這些挑戰(zhàn)的關(guān)鍵是開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì),最大限度地減少不一致的性能和簡(jiǎn)化了大規(guī)模生產(chǎn)。

　　本文中描述LabCD地址和滿(mǎn)足這些挑戰(zhàn)沒(méi)有移動(dòng)部件,只有依賴(lài)離心力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)反應(yīng)。這些屬性也使轉(zhuǎn)讓LabCD設(shè)計(jì)到大規(guī)模生產(chǎn)注塑,生產(chǎn)在生產(chǎn)運(yùn)行成千上萬(wàn)的可復(fù)制的光盤(pán)。與自動(dòng)化合成和檢測(cè)系統(tǒng),LabCD建立了微流體可以應(yīng)用于廣泛的試管和分析系統(tǒng)。www.52lvdd.cn

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