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| 鏈霉親和素包被的磁性微球的結(jié)合能力重要因素 | |||||||||||
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鏈霉親和素包被的磁性微球的結(jié)合能力的一個重要因素,對于大多數(shù)應(yīng)用,具有最高的總的結(jié)合通常是最好的,其他變量起著重要的作用。結(jié)合能力測量,因為在給定的結(jié)合的標(biāo)記物的微球中的每單位重量的重%的固體的懸浮液中,這些被提供獲得他們真正的結(jié)合能力是很重要的。在設(shè)計的任何試驗之前,我們建議百分比重量分析測量,以確保測量的%固體%固體與文??獻(xiàn)報道的相一致。圖5顯示了差異,我們發(fā)現(xiàn)幾家領(lǐng)先供應(yīng)商提供的材料在我們的實驗室。
圖。涉及的變量在確定鏈霉親和素包被的磁性微球的結(jié)合能力:(一)相對總結(jié)合和非特異性結(jié)合能力的微球從幾個供應(yīng)商的供應(yīng)商報告的%固體(R),根據(jù)實驗確定(重量)%的固體(EX);(二)添加和優(yōu)化吖啶標(biāo)簽,以減少非特異性結(jié)合阻斷劑的效果。
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同樣地,總的結(jié)合可以被分類的特異性和非特異性的約束力。前者是指通過鏈霉親和素債券生物素配體連接,而后者是指連接的配體,通過其他一些機(jī)制的正常疏水性吸附在顆粒表面(見圖5)。通過設(shè)計,使這兩種類型的綁定可以測量的結(jié)合容量的測定,可以使用各種類型的阻斷分子的優(yōu)化,以減少非特異性結(jié)合。
鏈霉親和素包被的磁性微球在免疫學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域,提供更傳統(tǒng)的固相支持的幾個優(yōu)勢。但是,使用這種類型的固體支持物的最大,重要的是要首先保證的結(jié)合能力,其特征在于最終的應(yīng)用程序?qū)⒆罱K使用的配位體的類型(大小和分子量)。果然,使得這種類型的固相支持物所涉及的技術(shù),擁有先進(jìn)的,所以用來描述他們的檢測的靈敏性和簡便性。由于免疫已從放射性酶促化學(xué)發(fā)光檢測,結(jié)合容量檢測緊隨其后。
我們試圖在這篇文章中的壓力點,一旦做出選擇的基礎(chǔ)上的免疫鏈霉親和素包被的磁性微球,重要的是要選擇微正在開發(fā)的檢測系統(tǒng)的基礎(chǔ)上他們的表現(xiàn)。變量影響性能不僅是總的結(jié)合,但結(jié)合分子的空間位阻的特性相類似的分子,將被用于在實際的測定。如果這個信息是不是可以從制造商,這里描述的檢測可以用于適當(dāng)?shù)谋碚鳌A硗?,在目前市場上的鏈霉親和素包被的磁性微球的基礎(chǔ)顆粒的特性變化很大。在開發(fā)這些綁定容量的檢測,我們看了在顆粒從多家供應(yīng)商,并作出比較,不僅基于總的結(jié)合,但如非特異性結(jié)合的特點,易于操作(如何迅速,他們可能被拉到一個標(biāo)準(zhǔn)的磁鐵),測量與報告的固體%,依此類推。我們認(rèn)為這些因素是至關(guān)重要的,以確保選擇的試劑是真正的最好選擇一個特定的應(yīng)用程序。
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約瑟夫·達(dá)菲,約翰V.墻,和瑪麗B.梅薩是在劉海實驗室的技術(shù)人員(漁民)的成員。勞拉J. Jenski,博士,生物學(xué)教授在美國印第安納大學(xué) - 普度大學(xué)(印第安納波利斯)。
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