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| 適體被用來驗(yàn)證的藥物靶標(biāo)和屏幕的候選藥物 | |||||||||||
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適配體的第一應(yīng)用領(lǐng)域的治療藥物,因?yàn)檫m配體可以阻止受體蛋白的活性,并抑制與高親和力和特異性。他們的優(yōu)點(diǎn),體積小,快速消除,生產(chǎn)成本低,生物相容性,生物可降解性,無交叉反應(yīng)抗體結(jié)合受體,使他們治療應(yīng)用的很好的候選人。但是,由于血液是含有豐富的核酸酶,適體的治療必須進(jìn)行修改,以避免核酸酶的攻擊。spigelmers,一種這樣的修改,是由L-核苷酸,而不是天然的D-核苷酸,因此,生物L(fēng)-核酸酶不能識(shí)別和切割人造寡核苷酸。
適體的一個(gè)最成功的治療中的應(yīng)用已經(jīng)在年齡相關(guān)性黃斑變性的治療。藥物Macugen(OSI制藥公司,梅爾維爾,紐約州)的適體,抑制抗血管內(nèi)皮生長因子,它參與的眼睛,造成視力下降的異常血管的生長。FDA已批準(zhǔn)藥物Macugen與新生血管性年齡相關(guān)性黃斑變性的患者。
ARC183(Gilead公司,福斯特城,加利福尼亞)是另一種適體與治療中的應(yīng)用。該抗凝血酶適體抑制大多數(shù)生理凝血事件,并已通過了I期臨床試驗(yàn)。適配體的治療中的應(yīng)用的其它例子包括目標(biāo)C5抑制人血清溶血活性的適體。8,后者抑制活性的胰蛋白酶樣蛋白酶的非結(jié)構(gòu)蛋白(NS3),丙型肝炎病毒的多蛋白促胰液從控制。
在它們的藥物應(yīng)用中,適配體已經(jīng)用于在分離化學(xué)領(lǐng)域。親和層析使用的選擇和從復(fù)雜混合物中分離的生物分子??贵w經(jīng)常被采用作為在固定相上的受體分子,由于其高親和力和選擇性。然而,他們在色譜法中的應(yīng)用是有限的。在除了一些先前確定的限制(見表I),其分子尺寸較大表面負(fù)荷限制在固定相上的親和基體的結(jié)合能力。進(jìn)一步加劇了這些困難更復(fù)雜的過程,獲得小分子抗體。
適配體已經(jīng)表明在親和層析中使用的承諾,因?yàn)樗鼈兛赡艿目贵w克服一些設(shè)計(jì)上的限制。例如,腺苷及其類似物已被成功地純化使用的固定相上支持的適配體。9此外,適配體已被被同樣地使用分離氨基酸和多環(huán)芳烴。
適配體可以作為在生物傳感器應(yīng)用中??的生物識(shí)別元件。柏盛國際結(jié)合,選擇性地檢測分析物與物理的轉(zhuǎn)導(dǎo)方法,該方法產(chǎn)生可測量的信號(hào)的響應(yīng)的動(dòng)作的生物物種的生物物種。一種生物傳感器的分析目標(biāo),但不一定是一個(gè)生物的起源。事實(shí)上,幾乎所有的化學(xué)分析物的可檢測的生物傳感器。
Aptasensors使用適體生物傳感器,生物識(shí)別元素。在1996年首次使用Aptasensors選擇性光學(xué)傳感器應(yīng)用組件,他們在那里人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶包被的磁珠與熒光標(biāo)記的核酸適配體組成的一個(gè)模型系統(tǒng)的一部分。
8個(gè)月后,出現(xiàn)了兩個(gè)新的例子,aptasensors:一種在其中放射性標(biāo)記的適配體被用來檢測不同的蛋白激酶C同功酶和酶聯(lián)夾心法使用了另一個(gè)SELEX來自熒光標(biāo)記的寡核苷酸12,13他們有至今已應(yīng)用在環(huán)境,工業(yè),國防和醫(yī)療等領(lǐng)域。
在過去的十年中,數(shù)百aptasensor論文已發(fā)表 ??,使用各種各樣的飽和電抗器(見表二)。這些應(yīng)用程序通常使用熒光標(biāo)簽。例如,L-腺苷檢測轉(zhuǎn)導(dǎo)的倏逝波誘導(dǎo)熒光凝血酶14檢測與適體的熒光淬滅對(duì)通過競爭性測定的熒光標(biāo)記的凝血酶和凝血酶適體修飾的光纖進(jìn)行。
適配體已經(jīng)使用在許多檢測技術(shù)。石英晶體微天平(QCM),表面等離子體激元共振(SPR)是兩種廣泛描述的技術(shù)用于非標(biāo)記的適配體的轉(zhuǎn)導(dǎo)和檢測。標(biāo)簽自由的蛋白質(zhì)檢測的策略是使用基于微懸臂傳感器,其與適配體官能化,作為已被用于測量的蛋白質(zhì)的特異性相互作用,免疫球蛋白E 的Taq DNA聚合酶。16原子力顯微鏡(AFM)的受體(IgE)的適體17此外,彈性表面波傳感器陣列游適體的檢測凝血酶和HIV-1的修訂版肽18。
最近,電化學(xué)aptasensors的已開發(fā),19例如,兩個(gè)適配體的夾心配置已使用的生物傳感器中,阻抗譜被用來檢測一個(gè)敏感的適體與IgE的相互作用。19,20適配體還用作電化學(xué)的信標(biāo),這是能夠經(jīng)過可測量的中靶分析物的響應(yīng)(參見圖2)的構(gòu)象變化的寡核苷酸分子。甲二茂鐵標(biāo)記的適配體信標(biāo)傳感器已用于凝血酶檢測,已經(jīng)開發(fā)了檢測可卡因電化學(xué)適體的信標(biāo)。
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