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| 實(shí)驗(yàn)室試管測試來檢測感染西尼羅河病毒 | |||||||||||
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從最初的西尼羅河病毒疫情在紐約市,制造商已經(jīng)開發(fā)出各種實(shí)驗(yàn)室試管測試來檢測感染西尼羅河病毒。 大多數(shù)的這些測試是基于檢測免疫球蛋白(即要么。 ,IgM,血液中免疫球蛋白g)或脊髓液,是因感染產(chǎn)生的,或病毒核酸片段在血液中通過使用核酸擴(kuò)增技術(shù)。
其他西尼羅河病毒測試包括凝集抑制實(shí)驗(yàn)(嗨)測試和蝕斑減少中和試驗(yàn)(PRNT)。 嗨測試測量的最高稀釋血清,抑制血凝試驗(yàn)(HI效價(jià))的紅細(xì)胞通過添加病毒特定的抗體在測試血清。 PRNT措施存在特定的中和抗體(IgM和免疫球蛋白g)在測試血清當(dāng)他們被添加到日益增長的病毒文化。 這個(gè)測試是進(jìn)行生物安全三級設(shè)施和用于確認(rèn)推定ELISA結(jié)果的積極。 但這些測試的進(jìn)行都是耗時(shí)的。
雖然用于篩選血液銀行樣本,核酸擴(kuò)增試驗(yàn)(NAAT)方法不容易適用于臨床診斷感染西尼羅河病毒。 雖然該方法具體檢測急性感染病毒血癥期間,少量的病毒核酸存在于血液可能沒有在臨床上重要或敏感的西尼羅河病毒在發(fā)展自疾病可能解決本身在許多情況下。 然而,輸血的血液感染西尼羅河病毒在免疫功能低下的患者可能會產(chǎn)生嚴(yán)重后果。 西尼羅河病毒的方法檢測NAAT收到間隙在美國和加拿大,是商業(yè)上可用來檢測所有病毒的存在在日本腦炎serocomplex。
檢測IgM的存在和免疫球蛋白g超過一定濃度閾值似乎是最有效的工具,西尼羅河病毒感染診斷。 通常,患者感染西尼羅河病毒檢測出含有大量的西尼羅河病毒特定血清IgM的postinfection第八天,而西尼羅河病毒特定的血清免疫球蛋白g是由三個(gè)星期postinfection檢測。 病毒本身通常不能被檢測到當(dāng)西尼羅河病毒特定血清IgM出現(xiàn),雖然兩個(gè)IgM和免疫球蛋白g可能保持超過一年。 基于這一事實(shí),美國疾病控制與預(yù)防中心開發(fā)了一個(gè)免疫球蛋白M抗體捕獲ELISA(mac ELISA)作為一個(gè)敏感的早期標(biāo)志西尼羅河病毒感染和一個(gè)相應(yīng)的免疫球蛋白g使用單克隆抗體的ELISA抗原捕獲車輛。 3、4 許多公共衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室采用這些測試來診斷西尼羅河病毒抗體在血液和脊髓液。
Panbio有限公司(澳大利亞昆士蘭)開發(fā)的第一個(gè)商業(yè)間接熒光抗體試驗(yàn),結(jié)果與CDC提供mac elisa通過使用西尼羅河病毒重組蛋白E抗原。 一個(gè)數(shù)量的IgM——和基于免疫球蛋白產(chǎn)生的ELISA檢測也專注技術(shù)有限公司(柏樹,CA),InBios國際有限公司(西雅圖),并通過使用信封Panbio重組蛋白E或西尼羅河病毒滅活的凈化作為抗原(NY 99應(yīng)變)。 這些測試已通過FDA和健康加拿大,是商業(yè)上可用。
其他西尼羅河病毒測試包括ELISA格式結(jié)合使用一個(gè)純化重組信封和非結(jié)構(gòu)化的西尼羅河病毒作為抗原蛋白5提高特異性。 另一個(gè)試驗(yàn)是一種熒光微球免疫分析格式,夫婦一個(gè)rWNV-E聚苯乙烯微球,可以抗原提供了依據(jù),同時(shí)測量多路微球免疫測定抗體活性重組抗原與幾個(gè)黃。 5、6 研究描述了雙微球免疫分析檢測的反西尼羅河病毒和反圣。 路易腦炎病毒,這幾個(gè)選擇性抗體微球。 7
之前,所有的西尼羅河病毒測試呈陽性或免疫球蛋白g市場主要是基于elisa設(shè)備(如。 、專注技術(shù)的西尼羅河病毒捕獲ELISA,Panbio IgM的西尼羅河病毒捕獲ELISA IgM)。 這些檢測是多步程序,要求儀表讀取測試,需要后續(xù)計(jì)算得到索引值解釋測試結(jié)果,并以6 - 10小時(shí)完成。 光譜診斷公司。(多倫多)最近發(fā)達(dá)RapidWN,快速檢測試紙條基于格式IgM測定產(chǎn)生結(jié)果的西尼羅河病毒在不到30分鐘,大體上是相當(dāng)于不僅CDC mac elisa但也關(guān)注”和Panbio ELISAs IgM的捕捉。 RapidWN已通過FDA許可、加拿大衛(wèi)生部。 與其他基于elisa設(shè)備,使用血清標(biāo)本,RapidWN測試可以執(zhí)行兩血清和血漿樣品。
在所有商業(yè)上可用IgM捕捉設(shè)備,因?yàn)樗麄儾粎^(qū)分過去和當(dāng)前的西尼羅河病毒感染,額外的免疫球蛋白g活動性也需要測試。 貪欲是通常估計(jì)基于能力的免疫球蛋白g來分離培養(yǎng)后的抗原與尿素溶液。 存在兩個(gè)IgM和低熱望在病人血清免疫球蛋白g表示最近的感染。 隨著感染的進(jìn)行,新生成的高親和力抗體免疫球蛋白顯示病毒抗原,免疫球蛋白g活動性增加。 高免疫球蛋白g的存在揭示了先前感染活動性。
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