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| 類似免疫熒光法的另一種免疫標記檢測方法 | |||||||||||
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| 免疫酶標記技術是類似免疫熒光法的另一種免疫標記檢測方法。它比免疫熒光法具有更多的優(yōu)越性，不僅敏感、特異和重現性高，而且操作簡便，不需要特殊設備，便于長期保存試驗結果。因而成為一種很有發(fā)展前途的免疫學試驗方法，其應用范圍已日益廣泛。 酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme—linked immuno-sorbent assay，ELISA)，或稱酶標記免疫吸附測定或酶連接免疫吸附測定，是固相吸附技術和免疫酶標記技術相結合的一種方法，也是目前免疫酶技術應用最為廣泛的方法。酶聯(lián)免疫吸附試驗是用酶標記的抗體(或SpA)檢測未知抗原或抗體的方法。此法敏感性高，特異性強。適合于ELIAA 檢測的環(huán)境化合物必須是親水性的、不揮發(fā)、在水中穩(wěn)定的化合物，如磺?；蛩亍被姿狨?、除莠劑及微生物的蛋白質產物等。 近年來ELISA試劑盒的商品化，為ELISA技術在環(huán)境檢測領域的大量運用創(chuàng)造了條件，并使之有可能成為常規(guī)分析法。20世紀80年代中后期開始，國外已有運用酶聯(lián)免疫吸附法快速檢測糧食中污染霉菌的報道。和以往的微生物快速檢測法相比較，酶聯(lián)免疫吸附法有快速、靈敏、特異、操作簡便、無需貴重的儀器設備等優(yōu)點。 20世紀80年代初，Hammock和Mummas首先將免疫分析用于農藥殘留分析。農藥免疫分析法不但具有與常規(guī)分析法相當或更高的靈敏度，而且無需使用昂貴的儀器設備，方法簡便快速，在農藥殘留的快速篩選和定量檢測以及現場和快速檢測方面已顯示出其獨特的優(yōu)點，受到環(huán)境監(jiān)測工作者的重視。盡管免疫分析用于農藥殘留檢測只有十多年時間，但發(fā)展很快。目前已建立了約50種農藥及降解產物的免疫測定法。 由于免疫分析固有的優(yōu)點，它在農藥殘留及其他環(huán)境污染物，如多聯(lián)苯、二噁英、天然真菌毒素、抗生素、添加劑等的快速篩選和定量檢測方面發(fā)揮著重要作用。這種新穎技術不再停留在研究階段，其中部分技術已商品化，為在環(huán)境監(jiān)測中應用創(chuàng)造了條件，并使之可能成為常規(guī)分析方法。 酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量的好壞直接關系到免疫酶技術的成功與否，因此被稱為關鍵的試劑。酶標記物中最常用的是酶標記抗體，它是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成。酶標記抗體的質量主要取決于純度好、活性強及親和力高的酶和抗體，其次要有良好的制備方法。目前，高質量的酶(如辣根過氧化物酶，簡稱HRP)國內已有商品供應。高質量的抗體則可通過提取純化而獲得。在制備方法上，宜選用產率高、不影響結合物的活性和不混雜干擾性物質且操作簡便易行的方法。 |
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