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| 基本的免疫學(xué)研究和診斷分析酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) | |||||||||||
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酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是一種最廣泛使用的技術(shù)在這兩個(gè)基本的免疫學(xué)研究和診斷分析。 因?yàn)镋LISA使多肽、蛋白質(zhì)、抗體、激素是選擇性地檢測(cè)到的濃度很小在大量的其他物質(zhì)與相對(duì)較低的成本和高簡(jiǎn)單,該方法提供了一個(gè)重要的和有用的工具,用于疾病監(jiān)測(cè)、診斷、興奮劑檢測(cè)、環(huán)境和食品分析。 ELISA方法產(chǎn)量都敏感和準(zhǔn)確的結(jié)果,采用自動(dòng)處理與一個(gè)微型板塊平臺(tái)允許快速傳導(dǎo)的測(cè)試在一個(gè)高通量的方式。
盡管ELISA方法被用于廣泛的不同測(cè)定法(如。 ,直接、間接、三明治、競(jìng)爭(zhēng)),所有的變量都是基于同樣的原則:綁定一個(gè)分析組件(如。 、抗原或特定的抗體)到固體表面,它的選擇性相互作用與隨后的補(bǔ)充分析組件。 分子,不專門與組件綁定到固體表面,洗去了在分析過程。
綁定的抗原或抗體標(biāo)記或與一個(gè)酶,直接或間接,測(cè)定了添加一個(gè)酶底物產(chǎn)生一個(gè)可測(cè)量的信號(hào)(如。 、放射性、比色、熒光或發(fā)光)。 特定的綁定的抗原和抗體可以被可視化通過合適的探測(cè)系統(tǒng),信號(hào)的強(qiáng)度與被分析物的量?jī)?nèi)部提供樣品,使的手段定量。
兩個(gè)酶的標(biāo)簽,在今天仍然廣泛使用辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(美聯(lián)社)。 當(dāng)連體與化學(xué)襯底、一個(gè)比色反應(yīng)生產(chǎn),合成的顏色可以測(cè)量通過吸光度或光學(xué)密度度數(shù)在分光光度計(jì)。
當(dāng)ELISA測(cè)試最初發(fā)達(dá),檢測(cè)的抗原和抗體之間的相互作用主要是基于放射性同位素標(biāo)記。 自那時(shí)以來,標(biāo)記方法已大大擴(kuò)大到包括酶或fluorophores,導(dǎo)致一個(gè)轉(zhuǎn)變,從放射化學(xué)檢測(cè)的分光光度法,熒光,或chemoluminescent儀器方法。 這些更新的檢測(cè)方法可以產(chǎn)生同樣敏感的結(jié)果與用放射化學(xué)方法獲得的,沒有與工作相關(guān)的問題與放射性材料,如生成和處理放射性廢物生物。
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